RNAi沉默中期因子基因表达对结肠癌细胞凋亡和化疗敏感性的影响
目的观察中期因子(midkine,MK)基因小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)对结肠癌细胞增殖、凋亡和化疗药物敏感性的影响。方法设计合成MKsi RNA,转染结肠癌SW620细胞。细胞分5组:空白对照组,脂质体对照组和3.125nmol/L、6.25nmol/L、12.5nmol/L的si RNA干预组。于不同时间收获细胞。分别以实时定量PCR和Western blot检测各组细胞MK的mRNA及蛋白表达,分别通过caspase-3和TUNEL检测结肠癌细胞凋亡,以MTT法检测100μg/L伊立替康(CPT-11)对各组肿瘤细胞的生长抑制率。结果si RN...
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Published in | Fu dan xue bao. Fudan University journal of medical science. Yi xue ban Vol. 35; no. 2; pp. 186 - 189 |
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Main Author | |
Format | Journal Article |
Language | Chinese |
Published |
复旦大学附属华山医院消化科,上海,20040%江苏大学附属人民医院肿瘤科,镇江,212003
2008
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Subjects | |
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ISSN | 1672-8467 |
DOI | 10.3969/j.issn.1672-8467.2008.02.006 |
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Summary: | 目的观察中期因子(midkine,MK)基因小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)对结肠癌细胞增殖、凋亡和化疗药物敏感性的影响。方法设计合成MKsi RNA,转染结肠癌SW620细胞。细胞分5组:空白对照组,脂质体对照组和3.125nmol/L、6.25nmol/L、12.5nmol/L的si RNA干预组。于不同时间收获细胞。分别以实时定量PCR和Western blot检测各组细胞MK的mRNA及蛋白表达,分别通过caspase-3和TUNEL检测结肠癌细胞凋亡,以MTT法检测100μg/L伊立替康(CPT-11)对各组肿瘤细胞的生长抑制率。结果si RNA可有效抑制SW620结肠癌细胞MKmRNA和蛋白表达水平。结肠癌细胞caspase-3活性增高,呈浓度和时间依赖性;TUNEL结果显示,凋亡细胞明显增多,呈时间和浓度依赖性。MTT结果显示:CPT-11对各组细胞均有抑制作用,以12.5nmol/L的最为明显,而各对照组细胞无明显差异。结论MKsi RNA可诱导结肠癌细胞凋亡和增加化疗药物的敏感性。 |
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Bibliography: | colonal carcinoma 31-1885/R colonal carcinoma;midkine;apoptosis;chemosensitivity R735.34 apoptosis midkine chemosensitivity |
ISSN: | 1672-8467 |
DOI: | 10.3969/j.issn.1672-8467.2008.02.006 |