南极磷虾羧肽酶A的分离纯化及其酶学性质分析

• Published in: 南方农业学报 Vol. 48; no. 8; pp. 1470 - 1476
• Main Author: 吴晶;周德庆;王珊珊;苏婷;朱兰兰
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 中国水产科学研究院 黄海水产研究所,山东 青岛 266071%中国水产科学研究院 黄海水产研究所,山东 青岛,266071%中国水产科学研究院 黄海水产研究所,山东 青岛 266071 2017; 中国海洋大学 食品科学与工程学院,山东 青岛 266003%中国水产科学研究院 黄海水产研究所,山东 青岛 266071; 上海海洋大学 食品学院,上海 201306; 农业部极地渔业开发重点实验室,山东 青岛 266071
• Subjects: 南极磷虾;羧肽酶A;分离纯化;酶学性质; separation and purification; 酶学性质; enzymatic property; carboxypeptidase A; 南极磷虾; Euphausia superba; 羧肽酶A; 分离纯化
• ISSN: 2095-1191
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2017.08.22

【目的】建立南极磷虾羧肽酶A的分离纯化方法，并研究分析其酶学性质，为南极磷虾羧肽酶A的开发及应用打下基础。【方法】南极磷虾粗酶液经硫酸铵分级沉淀、HiTrapDEAEFF阴离子交换柱层析和SEC70凝胶过滤柱层析，纯化得到的羧肽酶A，以SDS-PAGE分析其分子量；通过分析酶系反应温度、pH、金属离子、抑制剂对南极磷虾羧肽酶A活力的影响，明确其酶学性质和酶促动力学。【结果】南极磷虾羧肽酶A分子量为75.0kD，其最适温度30℃，最适pH8.0。Mg2+、Zn2+、Mn2+和Ni2+对南极磷虾羧肽酶A有显著的激活作用（P<0.05，下同），且金属离子浓度越高，激活效果越明显；Ca2+、Fe3+、Cu2+和Hg2+对南极磷虾羧肽酶A存在不同程度的抑制作用，以Hg2+的抑制作用最强，Fe3+的抑制作用最弱。金属蛋白酶抑制剂乙二胺四乙酸（EDTA）、3-苯基丙酸（3-phenylpropionicacid）和1,10-菲罗啉（1,10-phenathroline）对南极磷虾羧肽酶A活力有显著的抑制作用，且抑制剂浓度越高，抑制效果越明显。【结论】南极磷虾羧肽酶A具有金属蛋白酶特性，可开发成降解酶制剂在食品工业及医药行业中推广应用。