猪伪狂犬病病毒野毒SYBR-Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立

根据猪伪狂犬病病毒（PRV）gI/g E基因序列,设计一对特异性引物,建立了鉴别PRV野毒感染的荧光定量PCR方法。该方法灵敏度达到102拷贝/μL,与猪圆环病毒2型（PCV2）、猪细小病毒（PPV）、猪瘟病毒（CSFV）、乙脑病毒（JEV）不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性;用PRV强毒攻毒仔猪,荧光定量PCR比普通PCR能更灵敏检出组织带毒量。该方法可以用于猪的组织样品,如脑、肺、扁桃体、淋巴结等样品中伪狂犬野毒的定量,可用于临床伪狂犬野毒感染的早期检测和定量分析猪伪狂犬病毒感染程度。...

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Published in江西农业学报 Vol. 29; no. 9; pp. 1 - 4
Main Author 常晨 张道华 唐波 刘国阳 华涛 侯继波
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 江苏省农业科学院 国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏 南京 210014 2017
江苏省农业科学院 动物免疫工程研究所,江苏 南京 210014
江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏 扬州 225009
Subjects
SYBR-Green
检测
猪伪狂犬病病毒
荧光定量PCR
野毒
Real-time quantitative PCR
Wild-type virus
SYBR-Green
Porcine pseudorabies virus
荧光定量PCR
野毒
检测
Detection
猪伪狂犬病病毒
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Summary:根据猪伪狂犬病病毒（PRV）gI/g E基因序列,设计一对特异性引物,建立了鉴别PRV野毒感染的荧光定量PCR方法。该方法灵敏度达到102拷贝/μL,与猪圆环病毒2型（PCV2）、猪细小病毒（PPV）、猪瘟病毒（CSFV）、乙脑病毒（JEV）不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性;用PRV强毒攻毒仔猪,荧光定量PCR比普通PCR能更灵敏检出组织带毒量。该方法可以用于猪的组织样品,如脑、肺、扁桃体、淋巴结等样品中伪狂犬野毒的定量,可用于临床伪狂犬野毒感染的早期检测和定量分析猪伪狂犬病毒感染程度。
Bibliography:Porcine pseudorabies virus; SYBR-Green Ⅰ; Real-time quantitative PCR; Wild-type virus; Detection
36-1124/S
CHANG Chen1,2,3, ZHANG Dao-hua1,2,3, TANG Bo1,2,3 LIU Guo-yang1,2,3, HUA Zao1,2,3, HOU Ji-bo1,2,3 （1. Institute of Veterinary Immunology and Engineering, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014, China; 2. National Research Center of Engineering and Technology for Veterinary Biological Products, Jiangsu Academy of Agri- cultural Sciences, Nanjing 210014, China; 3. Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal In- fectious Diseases and Zoonoses, Yangzhou 225009, China）
We designed a pair of specific primers according to the sequence of gene g I/g E in porcine pseudorabies virus（PRV）,and established the SYBR-Green Ⅰ real-time quantitative PCR method for the detection of wild-type PRV. The sensitivity of this method reached 100 copy/μL. This method exhibited good specificity and repeatability,and it could prevent from the cross reactions between PRV and other porci
ISSN:1001-8581
DOI:10.19386/j.cnki.jxnyxb.2017.09.01